Logo GenDocs.ru

Поиск по сайту:  

Загрузка...

Лабораторная работа №4 Полимеразная цепная реакция (пцр) - файл


скачать (61.3 kb.)


Лабораторная работа № 4

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР, полимеразная цепная реакция – это ферментативное копирование определенного фрагмента ДНК in vitro c помощью ДНК-полимеразы, т.е. селективная амплификация ДНК. Границы фрагмента задают нуклеотидными последовательностями праймеров, поэтому копированию подвергается только определённый ген (ДНК-мишень), а не вся ДНК как при репликации in vivo. Основоположником метода считается Кэрри Муллис (Mullis, 1985).

ПЦР включает три циклически повторяющиеся стадии (рис.1):

1) денатурацию ДНК – расплетение двойной спирали и расхождение полинуклеотидных цепей;

2) отжиг праймеров – гибридизацию праймеров и одноцепочечной ДНК-мишени с образованием двухцепочечных комплексов «праймер-матрица», необходимых для инициации синтеза ДНК из мономеров – дезоксирибонуклеозидтрифосфатов;

3) полимеризацию – достраивание (удлинение, элонгацию) комплементарных цепей ДНК ферментом ДНК-полимеразой в направлении 5’→3’ начиная от 3’-OH концов присоединённых праймеров. Т.е. матричный синтез ДНК (нем. matrize, от латинского matrix – матка, источник, начало).

Р ис. 1. Общая схема ПЦР




Скачать файл (61.3 kb.)

Поиск по сайту:  

© gendocs.ru
При копировании укажите ссылку.
обратиться к администрации